članak: 1 od 1  
Vojnosanitetski pregled
2002, vol. 59, br. 6, str. 581-586
jezik rada: engleski
naučni članak
doi:10.2298/VSP0206581K

Produkcija faktora nekroze tumora-( u organo-kulturi eksplantata kože uva pacova pod dejstvom dinitrohlorobenzola - model za procenu kontaktne preosetljivosti
Vojnomedicinska akademija

Sažetak

Cilj. Reakcija kontaktne preosetljivosti (RKP) je lokalna inflamatorna reakcija kože na ponovljeni kontakt sa haptenom. Posledica je ćelijske infiltracije derma i oslobađanja medijatora inflamacije, a jedan od najvažnijih je faktor nekroze tumora-α (TNF-α). Klasična manifestacija kontaktne preosetljivosti je otok uva. U radu je testirana radna hipoteza da se koncentracija TNF-α u medijumu u kome su kultivisani eksplantati kože uva nakon RKP povećava sa povećanjem koncentracije nanetog haptena, i da su te promene u korelaciji sa promenama u otoku uva, koji predstavlja in vivo meru intenziteta RKP, kao i sa promenama u gustini infiltrata u dermu. Cilj rada bio je određivanje koncentracije TNF-α u medijumu u kome su kultivisani eksplantati kože uva tokom RKP na dinitrohlorobenzol i poređenje promena u koncentraciji TNF-α sa promenama u debljini otoka uva i gustini ćelijske infiltracije u dermu. Metode. Korišćen je ranije opisan model RKP na dinitrohlorobenzol (DNCB) kod pacova Albino Oxford soja. Veličina otoka uva izražavana je kao procenat zadebljanja levog u odnosu na desno uho. Uzorci kože uva patohistološki su analizovani, a gustina ćelijskog infiltrata u dermu merena je kompjuterskom obradom slike. Eksplantati kože kultivisani su tokom 24 časa, a u medijumu je zatim određivana koncentracija TNF-α ELISA-om. Rezultati. Utvrđeno je dozno-zavisno povećanje koncentracije TNF-α u medijumu i dozno-zavisno povećanje gustine infiltrata u dermu posle aplikacije 0,6%, 1,3% i 2,6% dinitrohlorobenzola na uho ranije senzibilisanih životinja. Osim korelacije između veličine otoka uva i gustine infiltrata u dermu (r=0,916, p<0,001), utvrđena je i korelacija između veličine otoka uva i koncentracije TNF-α u medijumu (r=0,933, p<0,001), kao i između gustine infiltrata u dermu i koncentracije TNF-α (r=0,865, p<0,001). Zaključak. Kultivacija eksplantata kože i merenje inflamatornih medijatora u medijumu za kultivaciju mogli bi da se koriste za dokazivanje inflamacije kože tokom reakcije kontaktne preosetljivosti, kao i za merenje njenog intenziteta.

Ključne reči

Reference

Blaylock, B.L., Kouchi, Y., Comment, C.E., Pollock, P.L., Luster, M.I. (1993) Topical application of T-2 toxin inhibits the contact hypersensitivity response in BALB/c mice. J Immunol, 150(11): 5135-43
Cassatella, M.A. (1995) The production of cytokines by polymorphonuclear neutrophils. Immunol Today, 16(1): 21-6
Harada, S., Dannenberg, A.M., Vogt, R.F., Myrick, J.E., Tanaka, F., Redding, L.C., Merkhofer, R.M., Pula, P.J., Scott, A.L. (1987) Inflammatory mediators and modulators released in organ culture from rabbit skin lesions produced in vivo by sulfur mustard. III. Electrophoretic protein fractions, trypsin-inhibitory capacity, alpha 1-proteinase inhibitor, and alpha 1- and alpha 2-m. Am J Pathol, 126(1): 148-63
Jorgensen, J., Wantzin, G.L. (1987) Sequential immunophenotypic study of lymphoid infiltrate in allergic and irritant reactions. Contact Dermatitis, 16(5): 239-45
Kajiki, A., Higuchi, K., Nakamura, M., Liu, L.H., Pula, P.J., Dannenberg, A.M. (1988) Sources of extracellular lysosomal enzymes released in organ-culture by developing and healing inflammatory lesions. J Leukoc Biol, 43(2): 104-16
Kandolf, L., Kataranovski, M., Berger, S., Milosavljević, I., Karadaglić, Đ. (1998) Experimentally induced contact hypersensitivity reaction to dinitrochlorobenzene, DNCB in rats. Archives of Toxicology, Kinetics and Xenobiotic Metabolism, 6, str. 267-8
Kataranovski, M., Karadaglić, Đ. (1999) Skin organ culture: A review. Acta Derm Venereol, 8, str. 131-40
Kataranovski, M.V., Drašković-Pavlović, B., Jovčić, G.S., Milojević, G., Todorović, V., Čolić, M.M., Popović, P. (2001) Peripheral blood granulocyte activity following contact sensitization of rats with dinitrochlorobenzene
Kawabata, T.T., Burleson, G.R., Ernst, P.B., Ullrich, S.E. (1995) Immunotoxicology of regional lymphoid tissue: The respiratory and gastrointestinal tracts and skin. Fundam Appl Toxicol, 26(1): 8-19
Komine, M., Rao, L.S., Kaneko, T., Tomić-Canić, M., Tamaki, K., Freedberg, I.M., Blumenberg, M. (2000) Inflammatory versus proliferative processes in epidermis. Tumor necrosis factor alpha induces K6b keratin synthesis through a transcriptional complex containing NFkappa B and C/EBPbeta. J Biol Chem, 275(41): 32077-88
Kondo, S., Kono, T., Brown, W.R., Pastore, S., McKenzie, R.C., Sauder, D.N. (1994) Lymphocyte function-associated antigen-1 is required for maximum elicitation of allergic contact dermatitis. Br J Dermatol, 131(3): 354-9
Kondo, S., McKenzie, R.C., Sauder, D.N. (1994) Interleukin-10 inhibits the elicitation phase of allergic contact hypersensitivity. J Invest Dermatol, 103(6): 811-4
Lappin, M.B., Kimber, I., Norval, M. (1996) The role of dendritic cells in cutaneous immunity. Arch Dermatol Res, 288(3): 109-21
Matsunaga, T., Katayama, I., Yokozeki, H., Nishioka, K. (1998) Epidermal cytokine mRNA expression induced by hapten differs from that induced by primary irritant in human skin organ culture system. J Dermatol, 25(7): 421-8
Piguet, P.F., Grau, G.E., Hauser, C., Vassalli, P. (1991) Tumor necrosis factor is a critical mediator in hapten induced irritant and contact hypersensitivity reactions. J Exp Med, 173(3): 673-9
Rikimaru, T., Nakamura, M., Yano, T., Beck, G., Habicht, G.S., Rennie, L.L., Widra, M., Hirshman, C.A., Boulay, M.G., Spannhake, E.W. (1991) Mediators, initiating the inflammatory response, released in organ culture by full-thickness human skin explants exposed to the irritant, sulfur mustard. J Invest Dermatol, 96(6): 888-97
Roupe, G., Ridell, B. (1979) The cellular infiltrate in contact hypersensitivity to picryl chloride in the mouse. Acta Derm Venereol, 59(3): 191-5
Ryan, C.A., Hulette, B.C., Gerberick, G.F. (2001) Approaches for the development of cell-based in vitro methods for contact sensitization. Toxicol In Vitro, 15(1): 43-55
Scheynius, A., Camp, R.L., Pure, E. (1993) Reduced contact sensitivity reactions in mice treated with monoclonal antibodies to leukocyte function-associated molecule-1 and intercellular adhesion molecule-1. J Immunol, 150(2): 655-63